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  • HEP3B,人喉表皮样癌细胞 消化要有个度
  • 点击次数:97 发布时间:【2018-07-03】
  • HEP3B人喉表皮样癌细胞  消化要有个度

    产品代号:HEP3B

    中文名称:人肝癌细胞

    种属:人

    是否鉴定:已鉴定

    库存状态:现货

     

    慧颖生物提供2000种类细胞株细胞系,400多株已鉴定细胞,涉及种属:人,大鼠,小鼠,兔子,鱼,牛,仓鼠等,我们提供好的产品,好的服务,好的技术,复苏周期短,价格优惠,细胞状态良好,饱满,有光泽,无支原体。

     

    HEP3B人喉表皮样癌细胞  消化要有个度

    细胞培养,尤其是细胞系的培养,就细胞消化而言,多做、善于总结,就可以把细胞养的越来越好

    绝大部分细胞消化只要用胰酶润洗一遍即可:

    吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。

    什么算是消化好了呢?

    不需要把细胞全部消化成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了。

    一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。

    细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。

    一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液。细胞只要能从基质上脱离下来,即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右)是正常的,不要再去延长消化时间,等待单细胞悬液出现。

    比较难消化的细胞:

    润洗方法5min还不能消化,以结肠癌细胞为例,比如HCT15、LS411和KM12细胞,胰酶消化,一般10 cm 培养皿,一次最多加入300ul-500ul就足够了。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,用胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。

     

    常规的细胞实验,受消化影响不是很大:

    如果不用胰酶去孵育而使用润洗的方法消化的话(难消化细胞例外)。但少数实验,比如病毒包装,对细胞代数,对细胞状态要求极高。这个时候,胰酶消化,就是润洗,都会对细胞包装病毒的能力有影响,传代次数一多,细胞包装能力就会逐渐下降。这个时候都不用胰酶消化,用一些盐溶液(不是EDTA液)即可。这些盐溶液通过影响细胞外基质相关酶的活性,来使得细胞脱离基质附着表面,但不切割任何蛋白。

     

    EDTA的作用:

    许多人不用胰酶,只用EDTA,或者用胰酶/EDTA联合作用。这里要明白,胰酶切割细胞外基质的一些负责粘连和附着的蛋白,而EDTA通过螯合Ca离子,作用于整联蛋白的活性,所以EDTA的作用更加温和。有的人在胰酶里添加一些EDTA,或者对付特别难消化的细胞,添加多一些EDTA,就是这个道理。一般不要试图延长消化时间(如果10min还消化不彻底的话),而应该想其它办法。

     

    PBS洗涤:

    消化之前用PBS洗涤,是常见的操作,因为血清中含有抑制胰酶的蛋白。对于一些难消化细胞,可以配制不含Ca,Mg离子的PBS,因为这些离子也会抑制胰酶的活性。但对于绝大部分细胞用胰酶或者EDTA溶液润洗即可消化,不需要配制不含Ca,Mg离子的溶液。

    细胞代号         细胞名称         种属         鉴定结果

    HEP3B人喉表皮样癌细胞  消化要有个度

    编号 中文名称  是否鉴定

    5637         人膀胱癌细胞             

    7703         人肝癌细胞         

    143B         人骨肉瘤细胞             

    22RV1      人前列腺癌细胞         

    293FT       人胚肾细胞         

    293T         人胚肾细胞         

    435S          人乳腺癌细胞/人黑素瘤细胞            

    453  人乳腺癌细胞             

    6T-CEM    T细胞白血病细胞         

    769-P        人肾细胞腺癌细胞             

    786-O       人肾透明细胞腺癌细胞             

    95-D          人高转移肺癌细胞             

    97H  人高转移性肝癌细胞         

    A172         人胶质母细胞瘤细胞         

    A2058       人黑色素瘤细胞         

    A2780       人卵巢癌细胞             

    A375         人黑色素瘤细胞株             

    A431         人表皮癌细胞             

    A498         人肾癌细胞         

    A549         人非小细胞肺癌细             

    A-673        人横纹肌肉瘤细胞             

    ACHN       人肾细胞腺癌细胞             

    AGS  人胃腺癌细胞             

    AN3CA     人子宫内膜腺癌(转移)细胞      

    ARH-77    人浆细胞白血病         

    ARO 没有,找不到信息             

    ARPE-19   人视网膜上皮细胞             

    B-CPAP     人甲状腺癌细胞         

    BEAS-2b   人正常肺上皮细胞             

    BEWO       人绒毛膜肿瘤细胞             

    BGC-823  人胃腺癌细胞(低分化)              

    BT-474     人乳腺导管癌细胞             

    BT-549     人乳腺管癌细胞         

    BXPC-3     人原位胰腺腺癌细胞         

    C-33 A      人子宫颈癌细胞         

    C643         人甲状腺癌细胞         

    C8166       T淋巴细胞白血病细胞        

    Ca Ski        人宫颈癌肠转移细胞/人宫颈癌上皮细胞       

    Caco2       人结直肠腺癌细胞            

    CAKI-1      人肾透明细胞癌皮肤转移细胞         

    cal-27       人舌鳞癌细胞             

    CALU-1     人肺癌细胞         

    CALU-3     人肺腺癌细胞(胸水)           

    CCD-1095SK     人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞             

    CCRF-CEM        人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞         

    CEM/C1   人急性淋巴细胞白血病细胞             

    CFPAC-1   人胰腺癌细胞             

    CNE1        人鼻咽癌细胞            

    CNE2        人鼻咽癌细胞            

    COLO 205         人结肠癌细胞             

    COLO 320DM  人结直肠腺癌细胞             

    CW-2        人结肠腺癌细胞         

    DAOY        Daoy细胞,具体不清楚            

    DAUDI      Burkitt's淋巴瘤细胞     

    DETROIT 562   人咽头癌胸水转移细胞             

    DLD-1       人结直肠腺癌上皮细胞             

    DU 145     人前列腺癌细胞         

    EA.HY926         人脐静脉细胞融合细胞             

    ECV304    人脐静脉内皮细胞             

    ES-2 人卵巢透明细胞癌细胞            

    FADU        人咽鳞癌细胞             

    FTC-133   人滤泡性甲状腺癌细胞             

    GBC-SD    人胆囊癌细胞             

    GCIY                       

    H1299      人非小细胞肺癌细胞         

    H1395      人肺腺癌细胞             

    H1650      人非小细胞肺癌细胞         

    H1703      人肺鳞癌细胞             

    H1755      人肺癌细胞       

    H1944      人非小细胞肺癌细胞         

    H1975      人肺腺癌细胞             

    H2170      人肺鳞癌细胞             

    H226         人肺鳞癌细胞             

    H292         人肺癌细胞(淋巴结转移)           

    H358         人非小细胞肺癌细胞       

    H460         人大细胞肺癌细胞            

    H520         人肺鳞癌细胞            

    H596         人肺腺鳞癌细胞         

    H661         人大细胞肺癌细胞             

    H716         人结直肠腺癌细胞             

    H838         人非小细胞肺癌细胞         

    Hacat       人永生化角质形成细胞             

    HBE 人支气管上皮样细胞         

    HBL-100   人整合SV40基因的乳腺上皮细胞           

    HCC1937 人乳腺癌细胞             

    HCC827   人非小细胞肺癌细胞         

    HCCC-9810      人胆管细胞型肝癌细胞             

    HCCLM3  人高转移肝癌细胞             

    HCT-116  人结肠癌细胞             

    HCT-8       人回盲肠癌细胞         

    HEC-1-A   人子宫内膜腺癌细胞         

    HEC-1-B   人子宫内膜腺癌细胞         

    HEK-293   人胚肾细胞         

    HEL  人红白细胞白血病细胞           

    HELA229  人宫颈癌复苏细胞             

    Hela-J                    

    Hep G2     人肝癌细胞         

    HEP-2       人喉表皮样癌细胞            

    HEP3B      人肝癌细胞         

    HEY          人卵巢癌细胞             

    HFF  人包皮成纤维细胞            

    HFL1         人胚肺成纤维细胞             

    HFOB1.19         SV40转染成骨细胞               

    HGC-27    人胃癌细胞(未分化)         

    HK-2          人肾皮质近曲小管上皮细胞             

    HL-60        人原髓细胞白血病细胞            

    HMEC-1   人微血管内皮细胞            

    HO-8910  人卵巢癌细胞             

    HPN1                    

    HS683       细胞人脑视神经胶质瘤细胞            

    Hs888Lu  人肺成纤维细胞         

    HT-1080   人纤维肉瘤细胞         

    HT-29       人结肠癌细胞            

    HT-3                       

    HTR8        人滋养细胞         

    HUCCT1   胆管上皮癌细胞              

    HuH-6       人肝母细胞瘤细胞         

    HUH-7      人肝癌细胞         

    HUT78      T淋巴细胞白血病细胞         

    HUVEC-C 人脐静脉内皮细胞             

    ISK                 

    JAR                

    JEG-3                     

    JEKO-1                   

    JurkatClone E6-1              

    K-562                     

    KATO III                 

    KLE                

    KTC-1                     

    KU812                    

    KYSE-150               

    LI-7                

    LNcap clone FGC                   

    L-O2              

    LOVO                     

    LS 174T                  

    MCF10A                

    MCF-7                    

    MDA-MB-231               

    MDA-MB-231(DMEM)                  

    MDA-MB-231(L-15)              

    MDA-MB-436               

    MDA-MB-468               

    MG-63                   

    MGC-803              

    MIA PaCa-2                   

    MM.1S                  

    MNNG/HOS Cl #5                  

    MRC-5                   

    MV4-11                 

    N87               

    NCI-H1299                     

    NCI-H1563                     

    NCI-H2452                     

    NCI-H647                       

    NK-92                     

    NTHY-ORI-31                

    OCM1A                 

    OS-RC-2                 

    OVCAR-3               

    PANC-1                  

    PC-3              

    PC-3M                   

    PC-9              

    PLC/PRF/5                      

    Raji                

    RBE               

    RD                 

    RKO               

    RL95-2                   

    RT4               

    RWPE-1                 

    SAOS-2                   

    SH-SY5Y                 

    SiHa              

    SJCRH30               

    SK-BR-3                 

    SK-HEP-1               

    SK-MES-1              

    SK-N-BE(2)                     

    SK-NEP-1               

    SK-N-SH                 

    SK-OV-3                

    SPC-A-1                 

    SU-DHL-6              

    SV-HUC-1                       

    SW 1990                

    SW1353                     

    SW480                   

    SW579                   

    SW620                   

    SW-620                  

    SW839                   

    SW982                   

    T/G HA-VSMC               

    T-24              

    T47D                      

    T82                

    T84                

    TCA-8113                       

    TE 353.Sk                      

    TE-1              

    THP-1                     

    TMK1                     

    TPC-1                     

    TT                  

    TTA1                       

    U-118MG                       

    U-2 OS                   

    U251                      

    U87                       

    U-87MG                

    U-937                     

    UM-UC-3              

    VCAP                      

    WERI-RB-1                     

    WI-38                     

    WISH                      

    WPMY-1                    

    ZR-75-1                 

    ZR-75-30               

     

     

     

     

     

     

主营产品:细胞株、Hs578Bst细胞、ND7/23细胞、bel-7407细胞、EA.hy926细胞、A2780细胞、人肝癌细胞株、RAW264.7细胞、NB4细胞、Sp2/0细胞、KYSE30细胞
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